1、儀器具體介紹:
4D細胞核轉染系統模塊化設計,由Core unit(核心單元),和X unit(X功能單元),和/或Y unit(Y功能單元)等功能單元組成,每個(gè)功能單元適合于不同的應用需求。
型號:4D
廠(chǎng)家:德國Lonza公司
組成:- Core unit(核心單元:為4D-Nucleofector細胞核轉染系統提供脈沖;
- X unit(X單元):支持不同規格、不同細胞數的轉染平臺;適用于在 16-孔貼壁電轉板條中的原位貼壁轉染;
- Y unit(Y單元)——提供24-孔細胞培養板中的原位貼壁核轉染平臺
功能搭配:
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- 核心單元和各功能單元可以平行拼接或疊放;
- 靈活地選擇和組裝4D細胞核轉染系統;
- 可操控軟件:實(shí)驗者根據實(shí)驗需求,可以自己設計和存儲實(shí)驗設置;
- USB接口與電腦連接:軟件升級和數據傳送,如實(shí)驗者可以通過(guò)電腦預先定義實(shí)驗設置;
- 可接駁96孔shuttle轉染儀
2、配套轉染試劑盒:
4D-Nucleofector細胞核轉染系統采用導電性聚合物,取代了金屬鋁離子,保證高效轉染的同時(shí)獲得高的細胞存活率。
技術(shù)專(zhuān)利
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專(zhuān)利的導電性聚合物電轉杯和電轉板條
- 專(zhuān)利的導電性聚合物材料替代傳統的金屬鋁離子電極
- 克服傳統金屬電極釋放的金屬離子(Al3+對細胞的毒性)對轉染效果的影響。
- 提高(或維持)轉染效率的同時(shí),保證細胞的生理特性。
- 規格:?jiǎn)慰纂娹D杯(100μl)/16孔電轉板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
品種:
X功能單元核轉染試劑盒
- 3種細胞系轉染試劑盒:SE, SG, SF電轉液;
- 5種原代細胞轉染試劑盒:P1, P2, P3, P4, P5電轉液
- 2種優(yōu)化轉染試劑盒
Y功能單元原位貼壁核轉染試劑盒
- 原位貼壁核轉染試劑盒AD1:神經(jīng)元原位貼壁轉染;
- 原位貼壁核轉染試劑盒AD2
種類(lèi):
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組成:
- 細胞特異性核轉染液
- 添加劑
- pmaxGFP陽(yáng)性質(zhì)粒
- 單孔電轉杯(100μl)/16孔電轉板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
- 塑料吸管(與單孔電轉杯配套)
規格:多種規格,如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等
3、原位核轉染技術(shù):“原位核轉染技術(shù)”突破了傳統電穿孔技術(shù)只能在細胞懸液中轉染的缺陷,實(shí)現了貼壁細胞在培養的不同階段中直接進(jìn)行轉染的核轉染。
2010年,Lonza推出了4D系統,其中利用X unit的16孔電轉板條,推出了第一個(gè)原位核轉染試劑盒;
2010年,Lonza推出了適用于96孔shuttle系統的新原位轉染試劑盒——96孔電轉板條。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔細胞培養板中進(jìn)行原位核轉染。
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“All-in-one” Process——細胞培養、轉染、觀(guān)察和分析都在同一細胞培養板中或電轉板中實(shí)現。
分離后的原代神經(jīng)元直接接種到鋪有多聚賴(lài)氨酸的24孔培養板中或電轉板條中。神經(jīng)元細胞能貼壁培養多達14d,并在培養過(guò)程的任何時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行轉染或多次轉染。
優(yōu)勢:
– 可在神經(jīng)元貼壁生長(cháng)的任何階段進(jìn)行原位核轉染或多次進(jìn)行原位核轉染
– 原位轉染前、中、后,神經(jīng)元都培養在24孔細胞培養板中,維持貼壁生長(cháng)的生理狀態(tài)
– 唯一轉染效率最高可達70%的非病毒轉染方法
– 整個(gè)過(guò)程維持了細胞功能
– 適用于共聚焦顯微鏡下觀(guān)察和分析
(1)、24孔細胞培養板中貼壁細胞的原位核轉染技術(shù):4D細胞核轉染系統-Y功能單元
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