用于懸浮/貼壁哺乳動(dòng)物真核細胞的大容量核酸轉染儀
LONZA 4D-Nucleofector LV 大規模細胞核轉染系統(4D-Nucleofector LV Unit,簡(jiǎn)稱(chēng)LV模塊,或LV單元),是在傳統電穿孔技術(shù)的基礎上,針對每一種細胞,優(yōu)化電脈沖參數、轉染液,使細胞轉染效率、細胞活率得到顯著(zhù)提升,解決了原代細胞、干細胞、T細胞等使用傳統電穿孔轉染效率低下的問(wèn)題。
4D-Nucleofector核轉技術(shù)(原德國Amaxa Nucleofection核轉染技術(shù))對質(zhì)粒DNA轉染效率高達90%,寡核苷酸(如siRNA)轉染效率高達99%,面世20年來(lái),已成功轉染>1200種細胞系、>130種原代細胞,并在干細胞、免疫細胞、神經(jīng)細胞等各類(lèi)較難轉染的細胞中獲得了優(yōu)秀的轉染效果。
同時(shí),4D-Nucleofector核轉染可讓外源基因直接穿過(guò)核膜進(jìn)入細胞核,不依賴(lài)細胞有絲,實(shí)現2小時(shí)快速表達。LONZA 4D-Nucleofector LV模塊可提供單次最高2×10^9個(gè)細胞、封閉、無(wú)菌的高效轉染,在人T細胞、CHO懸浮細胞、HEK23懸浮細胞、K562細胞等超過(guò)700種細胞中大量應用。
LONZA全球共享數據庫,包含超過(guò)1500種原代細胞、細胞系的轉染數據,提供包括細胞來(lái)源、傳代、培養條件、培養基、到轉染后培養技巧的成熟流程,讓研究者在海量數據支持中快速開(kāi)展實(shí)驗,并取得成功。操作4D-Nucleofector核轉染設備時(shí),只需一鍵調用LONZA內置的轉染程序,即可實(shí)現細胞快速、高效轉染,而無(wú)需自行摸索轉染條件。
4D-Nucleofector核轉染技術(shù)優(yōu)勢
-采用高分子聚合物電極,避免傳統鋁電極的離子毒害,維持細胞生理狀態(tài),提高存活率。
-轉染后可快速觀(guān)察實(shí)驗結果,例如轉染GFP后最快2小時(shí)可觀(guān)察到蛋白。
-無(wú)需自己優(yōu)化條件,擁有超過(guò)650種細胞類(lèi)型的現成程序,可直接使用,全球共享數據庫,超過(guò)1500條轉染數據可供參考。
-可轉染包括DNA、mRNA、miRNA、siRNA、肽、蛋白質(zhì)在內的多種底物。
-可用于難以轉染的原代細胞、干細胞、神經(jīng)元、細胞系。
-靈活的轉染規?s放,可在低、中、高通量中輕松轉移,實(shí)現2×10^4至1×10^9個(gè)細胞數量的輕松擴展。
-已在全球8000多家同行評議的出版物中發(fā)表。
LONZA 4D-Nucleofector LV大規模細胞核轉染儀,細胞治療基礎研究高效電轉染系統
1、封閉、無(wú)菌的系統和耗材設計,滿(mǎn)足細胞治療基礎研究的需求。
2、20mL大容量,LV核轉儀提供單次1mL(最多1×10^8個(gè)細胞)的手動(dòng)加樣、20×1mL(最多2×10^9個(gè)細胞)的自動(dòng)加樣,快速高效。
3、符合cGMP要求,可使用符合美國FDA21 CFR part 11、歐盟Annex 11的軟件進(jìn)行控制,適用于嚴格監管的GMP實(shí)驗室。
①用戶(hù)管理(登陸,不同級別)
②具有用戶(hù)姓名與時(shí)間標記的電子簽名
③任何記錄的修改或是數據的創(chuàng )建均被記錄在案
④結果報告:失敗報告,以及詳細的問(wèn)題描述
⑤可根據21CFR part11的要求導出數據(加密,預防)
⑥審計追蹤(使用記錄、更改記錄)
⑦無(wú)數據刪除可能
4、規?珊(jiǎn)單放大,在4D-Nucleofector X模塊(4D-Nucleofector X Unit,簡(jiǎn)稱(chēng)X模塊,或X單元)上進(jìn)行的2×10^4細胞數量的優(yōu)化轉染方案,可直接在LV模塊上使用。
實(shí)驗數據:分別用4D-Nucleofector細胞核轉儀X模塊(100μL)、LV模塊(1mL)向包括人T細胞、PBMC、293細胞、CHO細胞在內多種代表性細胞中轉染pmaxGFP載體,實(shí)現轉染規模的線(xiàn)性放大。
參考文獻
1.Closed-system transposon-mediated manufacture of GMP grade CAR T-cells via the Lonza Nucleofector LV XL. LM Brownrigg,et al. ELSERIER(2020)
2.Biomimetic mineralized collagen scaffolds and their effect on osteogenic differentiation. L Luo,et al. ELSERIER(2020)
3.Optimization of clarification process for viral vectors. B Raghavan,et al. ELSERIER(2020)
4.Generation and testing of clinical-grade exosomes for pancreatic cancer. Mayela Mendt,et al. JCI Insight(2018)
5.Off the shelf T cell therapies for hematologic malignancies. BJ McCreedy,et al. ELSERIER(2018)
6.Unlocking the Potential of CRISPR-Based Gene Editing. Andrea Toell. Genetic Engineering & Biotechnology News(2017)
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